Nhuộm pas kết hợp xanh alcian

1. NGUYÊN LÝ

Phương pháp nhuộm phân biệt các nhóm mucopolysaccharit axit và trung tính, đặc biệt ở các phiến đồ từ ổ tổn thương do ung thư di căn (chất nhầy axit có màu xanh).

2. CHUẨN BỊ

2.1. Người thực hiện

Kỹ thuật viên giải phẫu bệnh - tế bào bệnh học: 02

2.2. Phương tiện, hóa chất:

- Dung dịch cố định phiến đồ.
- Cồn (70o, 80o, 90o, 100o).
- Nước cất 2 lần.
- Axit photphomolybdic.
- Xanh alcian
- Thuốc thử Schiff
- Dung dịch Bisulfit Natri
- Tủ hốt phòng thí nghiệm
- Bể nhuộm bằng thủy tinh
- Bể thủy tinh đựng cồn
- Giấy lọc
- Bôm Canada hoặc keo gắn lá kính.
- Kính hiển vi 2 mắt để kiểm tra kết quả nhuộm.
- Nguồn cấp nước chảy.
- Kính phòng hộ, găng tay, khẩu trang, áo choàng.

3. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

- Phiến đồ đã cố định, nhuộm 20 phút trong dung dịch nước xanh Alcian 0,1%.
- Rửa và nhúng 6 phút trong dung dịch nước axit photphomolybdic.
- Rửa cẩn thận trong nước cất 10 phút.
- Đặt phiến đồ vào dung dịch axit periodic 0,8%.
- Rửa nước cất 5 phút.
- Nhuộm thuốc thử Schiff trong 60 phút.
- Nhúng vào dung dịch Bisunfit Natri 3 lần, cách nhau 20 phút.
- Rửa nước chảy trong 5 phút.
- Lần lượt cho qua cồn có nồng độ cao dần (70o, 80o, cồn tuyệt đối).
- Làm trong và gắn lá kính như thường lệ.

4. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

Chất nhầy axit có màu xanh